澳洲矮牛胚胎移植試驗(yàn)報(bào)告
純種澳洲矮牛成年經(jīng)產(chǎn)母牛4頭,產(chǎn)犢時(shí)間為2007年5-6月份。受體:周邊農(nóng)戶散養(yǎng)的本地黃牛(大別山黃牛)22頭,產(chǎn)犢時(shí)間為2007年2-7月份。
1.2.2儀器設(shè)備二路式?jīng)_胚槍、擴(kuò)張棒、黏液去除棒、集卵杯、水浴鍋、溫度計(jì)、顯微鏡、胚胎移植槍等。
1.2.3試劑藥品FSH用了2種,分別產(chǎn)于新西蘭和寧波:PGF2α來(lái)自上海計(jì)生所;沖胚液購(gòu)自北京潭河公司;其他藥品主要有靜松靈等。
1.3方法
1.3.1前期處理參考國(guó)內(nèi)其他肉牛品種的胚胎移植方法,用PG做同期、FSH做超排,供體3次同期、受體2次,同期間隔10d,供體最后1次同期前3d開(kāi)始超排。PG用量8mL/次·頭,上、下午各4mL。新西蘭產(chǎn)FSH為小瓶裝,20mL/瓶(1頭份),按4:3:2:1遞減、分4d注射,每日2次;寧波產(chǎn)FSH為安瓿裝,100IU/支,按300IU、300IU、200IU、200IU,分4d注射,每日1次,兩種FSH分別處理2頭供體。
1.3.2沖胚與移植直腸清糞,檢查卵巢上黃體情況。確定是否沖胚。擴(kuò)張子宮頸。去除黏液,插入二路式?jīng)_卵器。沖胚液事先加熱到35℃。集卵杯收集胚胎,顯微鏡下檢查,符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的胚胎裝槍。受體牛檢查卵巢,對(duì)黃體發(fā)育好的進(jìn)行鮮胚移植。
1.3.3妊娠診斷移植后13-16d觀察返情情況。初步確定受孕情況。90d后通過(guò)直腸檢查進(jìn)行準(zhǔn)確診斷。
2結(jié)果與分析
2.1同期發(fā)情
22頭受體與4頭供體經(jīng)過(guò)2-3次處理,最終全部達(dá)到同步,前后相差不超過(guò)24h,充分表明供、受體對(duì)PG反應(yīng)良好。
2.2超數(shù)排卵
供體牛超排情況見(jiàn)表1。
由表1可以看出,209#與241#的黃體數(shù)達(dá)到8個(gè),超排反應(yīng)明顯;236#反應(yīng)微弱,僅有2個(gè)黃體;240#基本沒(méi)有反應(yīng)。不適宜進(jìn)行沖胚處理。有反應(yīng)的3頭??傆?jì)沖出胚胎13枚,平均4.3枚/頭,但個(gè)體間差異極顯著。而241#的黃體發(fā)育好,但沖胚數(shù)量少,可能與實(shí)際操作有關(guān)系。雖然國(guó)產(chǎn)藥物處理后的沖胚數(shù)量多于進(jìn)口藥物處理組,但從黃體反應(yīng)來(lái)看,兩種藥物應(yīng)該沒(méi)有顯著差異,由于樣本數(shù)量較少,所以還需進(jìn)一步驗(yàn)證。
2.3鮮胚移植與妊娠診斷
共移植胚胎12枚。經(jīng)移植后觀察,有2頭受體返情,預(yù)期受胎率為83.3%。
3小結(jié)與討論
3.1澳洲矮牛的胚胎移植
參試的4頭供體對(duì)PG反應(yīng)良好,同期發(fā)情率100%,可以按此劑量進(jìn)行下次胚移。本次試驗(yàn)用的劑量為3×(4mL+4mL),下次可以嘗試設(shè)計(jì)3×(4mL+2mL)的處理,減少藥物投入。供體對(duì)FSH的反應(yīng)在個(gè)體間差異十分明顯,最多的沖出10枚胚胎,最少的僅有1個(gè)黃體(不適宜進(jìn)行沖胚),擴(kuò)大供體的群體數(shù)量,是保證胚胎能批量生產(chǎn)的基礎(chǔ)。盡管沖胚數(shù)有差異,但根據(jù)黃體情況判斷,國(guó)產(chǎn)FSH和進(jìn)口的超排效果應(yīng)該沒(méi)有顯著差異,當(dāng)然這需要擴(kuò)大樣本數(shù)量進(jìn)行進(jìn)一步的驗(yàn)證。操作人員的技術(shù)熟練程度是胚胎移植工作成功的關(guān)鍵,241#是本次操作的第1頭,沖出的溶液呈現(xiàn)淡紅色,表明子宮黏膜有少量損傷和出血,影響了沖胚效果,209#是操作的第3頭,效果最好。較高的預(yù)期受胎率(83.3%),與樣本數(shù)量小有關(guān)系,當(dāng)然更需要3個(gè)月后的直檢確診。
3.2澳洲矮牛的利用
澳洲矮牛是小型肉牛品種,成年體重僅500-600kg,遠(yuǎn)低于西門(mén)塔爾、夏洛萊等大型肉牛品種。盡管其體型小,但該品種具有生長(zhǎng)速度快、育肥性能好、肉質(zhì)好、適應(yīng)性強(qiáng)等優(yōu)勢(shì),尤其是我國(guó)南方黃牛的體型較小,大型品種的改良后代容易發(fā)生難產(chǎn),而用澳洲矮牛則可有效避免這一問(wèn)題。
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